Abstract FR:

La distribution du cholesterol dans les membranes des cellules epitheliales a ete determinee dans des vesicules de membranes de bordures en brosse (mbb) isolees a partir du cortex renal de lapin et dans les cellules llc-pk1 (cellules renales porcine d'origine proximale) en utilisant la cholesterol oxydase. L'oxydation du cholesterol dans les mbb natives, par la cholesterol oxydase de brevibacterium. Sp revele l'existence de deux compartiments de cholesterol dans ces membranes. La taille de ces compartiments varie selon l'origine de la cholesterol oxydase utilisee. Cette distribution heterogene du cholesterol dans les mbb a ete confirmee par l'utilisation d'une sonde fluorescente, le diphenylhexatriene (dph). Nos resultats suggerent que des interactions cholesterol-lipides, en particulier cholesterol-sphingomyeline sont a l'origine de cette heterogeneite de distribution du cholesterol dans les mbb renales. Les resultats de mesures de polarisation de fluorescence montrent que l'oxydation de 90% du cholesterol des mbb par la cholesterol oxydase ne diminue que de 14% l'anisotropie de fluorescence en etat stationnaire (r#s#s) du dph a 37c. Cette diminution est due a un changement de l'ordre des lipides membranaires. L'oxydation de moins de 30% du cholesterol des mbb n'a qu'un effet tres faible sur le r#s#s du dph. Ceci suggere qu'une fraction significative du cholesterol membranaire n'interagit que faiblement avec les autres lipides membranaires. La repartition du cholesterol entre la membrane plasmique et les membranes intracellulaires dans les cellules renales a ete etudiee dans les cellules llc-pk1. Les resultats obtenus suggerent que 90% du cholesterol cellulaire reside dans la membrane plasmique. Ils indiquent aussi que le glutaraldehyde rend indiscernable les differents compartiments de cholesterol membranaire