Abstract FR:

L'enzyme bifonctionnelle glmu est une enzyme cytoplasmique de la voie de biosynthese du peptidoglycane, polymere important de la paroi des bacteries. Glmu est une enzyme essentielle a la survie de la bacterie et constitue, par consequent, une cible potentielle pour la recherche de nouveaux agents antibacteriens. Glmu catalyse la formation d'udp-glcnac, precurseur important de la biosynthese du peptidoglycane et des lipopolysaccharides, par deux reactions successives. Elle porte les activites d'acetyltransferase et d'uridyltransferase. Par des modifications chimiques et par mutagenese dirigee, nous avons montre le role de certains residus dans l'une ou l'autre de ces deux activites. Deux cysteines sont impliquees dans la reaction d'acetylation, et d'autres residus (g14, g16, r18, k25, d105, e154) de la partie n-terminale de la sequence sont impliques dans la reaction d'uridylation. D'autre part, par des constructions de variants tronques en n ou c-terminal de la sequence de la proteine, nous avons mis en evidence la presence de deux domaines distincts dans la structure de glmu, dont chacun porte l'une des deux activites. Enfin, les resultats de cristallographie obtenus sur un variant tronque en position c-terminal de la sequence de glmu, nous ont permis de comparer les resultats biochimiques a la structure tridimensionnelle de la proteine et de ces sites actifs. Glmu est composee de deux domaines distincts separes par une helice de 21 acides amines. Le domaine n-terminal est un motif rossmann fold et porte l'activite uridyltransferase, le domaine c-terminal est un prisme lh specifique des acetyltransferases. Ces approches biochimiques et structurales pourront permettre une meilleure connaissance des sites actifs de la proteine pour la conception d'inhibiteurs potentiels de glmu.