Abstract FR:

Le but de cette etude est de caracteriser les proprietes in vitro des cellules satellites du muscle squelettique humain. Ces cellules sont localisees a la surface de la fibre musculaire squelettique. Elles sont normalement mitotiquement quiescentes mais peuvent etre activees lors de la degenerescence des fibres musculaires. Elles entament alors une phase de proliferation puis fusionnent pour former de nouvelles fibres musculaires. La premiere partie de ce travail decrit une nouvelle procedure de purification des cellules satellites ou elles sont prelevees a l'aide d'une micropipette, sous controle microscopique, puis transferees individuellement dans des puits de culture ou elles se divisent. Elles forment alors ce qu'on appelle une population clonale de myoblastes. Nous avons egalement realise une procedure automatique de purification des cellules satellites par cytometrie de flux, tres utile en cas de greffe de ces cellules. La deuxieme partie est consacree aux proprietes in vitro de proliferation et de fusion des myoblastes. Nous montrons que les cellules satellites sont des cellules souches capables de former soient des nouvelles cellules identiques a elles memes, soient des cellules au phenotype plus differencie destinees a fusionner. La troisieme partie est consacree aux proprietes electrophysiologiques de ces cellules a differents stades de developpement. Nous avons observe que les courants cationiques se developpent selon un modele d'apparition sequentiel, de la cellule satellite fraichement isolee qui ne se divise pas encore, jusqu'au myoblaste tres mature en phase de pre-differenciation. La quatrieme partie consiste a demontrer que l'acetylcholine est impliquee dans le processus de fusion in vitro de ces cellules. En effet, les recepteurs cholinergiques nicotiniques fonctionnels sont fortement exprimes juste avant le processus de fusion. Par ailleurs, l'activation de ces recepteurs stimule la fusion cellulaire. Fait interessant, nous montrons qu'un compose aux proprietes similaires a celles de l'acetylcholine est libere par les cellules myogenes en culture