Abstract FR:

Nous étudions dans ce travail les mécanismes régulant la concentration intracellulaire l'Ap₄A et d’autres dinucléosides polyphosphates apparentés. Nous cherchons aussi à élucider la fonction de ces nucléotides. Les principaux résultats se résument ainsi. 1) Importance du zinc dans la synthèse des dinucléosides tri- et tétraphosphates : le zinc stimule spécifiquement la synthèse de ces nucléotides par certaines aminoacyl-tARN synthétases, les mêmes dans toutes les espèces étudiées. Cette constance au cours de l’évolution plaide en faveur de l’importance du zinc dans le métabolisme de ces nucléotides. 2) Purification et caractérisation d’une Ap₄A en deux ADP, et l'Ap₄A hydrolase d’E. Coli : cette enzyme hydrolyse l'Ap₄A en deux APD, et l’Ap₃A en ADP+AMP. Elle est très fortement stimulée par les ions cobalt et manganèse. 3) Mesure des dinucléosides polyphosphates dans des cellules d’E. Coli et de drosophile : l’accumulation de ces nucléotides en réponse à un stress oxydant a été généralisée à un eucaryote supérieur, la drososphile. D’autre part, l’existence de dinucléosides polyphosphates dans des cellules d’E. Coli en phase exponentielle a été établie. Des expériences sur des cellules bactériennes synchronisées montrent cependant que la concentration intracellulaire de ces nucléotides est constante au cours du cycle cellulaire. Ceci est à l'opposé de ce qui a été décrit chez les eucaryotes. 4) Clônage du gène de l'Ap₄A hydrolase d’E. Coli : ce clônage a permis la construction de souches affectées dans leur concentration intracellulaire d’Ap₄A. Ces souches devraient être d’une grande utilité pour comprendre les rôles biologiques de ce nucléotide.