Abstract FR:

L'utilisation therapeutique d'anticorps monoclonaux humains a jusqu'a present ete limitee par leur faible diversite, due aux problemes rencontres dans les technologies classiques d'immortalisation cellulaire. Les progres realises dans les technologies de l'adn recombinant permettent d'envisager une nouvelle strategie. Les sequences codant pour les parties variables (specificite et affinite) et constantes (proprietes effictrices) d'immunoglobulines (ig) sont selectionnees de maniere independante puis associees et exprimees afin d'obtenir des ig humaines possedant les proprietes recherchees. Cette strategie a ete evaluee afin d'obtenir de nouveaux anticorps anti-rh(d) utilisables dans la prevention de l'alloimmunisation foeto-maternelle. Les ig recombinantes commutees obtenues ont presente des proprietes modifiees par rapport aux ig parentales. En particulier, une ig commutee a montre une meilleure capacite a induire la phagocytose d'hematies rh+ sensibilisees que ses 2 ig parentales. Deux systemes d'expression ont ete compares. Le myelome murin p3x63 ag8. 653 permet de produire des ig recombinantes similaires a des ig d'hybridomes et de caracteriser de nouveaux anticorps. Mais une dimunition rapide de la production en milieu non selectif compromet son utilisation a une echelle industrielle. La lignee lymphoblastoide humaine rpmi 1788 permet de produire des chaines d'ig recombinantes de maniere stable sur de longues periodes de culture. La production d'une ig recombinante monoclonale n'est cependant envisageable avec cette lignee qu'apres arret de la production d'une igm endogene, par exemple par recombinaison homologue. L'ensemble de ce travail a montre qu'un choix approprie des parties constantes et variables d'ig, suivi de leur expression dans une cellule hote lymphoide conduit effectivement a l'obtention d'ig recombinantes ayant les proprietes requises pour une application therapeutique.