thesis

Etude de la structure d'endotoxines de bacteries du genre bordetella

Defense date:

Jan. 1, 1998

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Institution:

Paris 11

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Abstract FR:

Les endotoxines sont des constituants heterogenes majeurs de la paroi des bacteries a gram negatif. Elles sont composees de trois regions principales dont la structure generale et les voies de biosynthese sont differentes : (i) le lipide a generalement, constitue d'un disaccharide de glucosamines reliees par une liaison 1-6, contient des groupes phosphates et des acides gras ; (ii) le noyau oligosaccharidique compose d'une dizaine de residus osidiques et (iii) les chaines-o specifiques formees par des unites repetitives portant les determinants antigeniques. L'importance de ces lipopolysaccharides (lps) reside dans le fait qu'ils sont responsables d'un nombre impressionnant d'activites aussi bien nefastes que benefiques pour l'homme et l'animal. La structure de l'endotoxine de bordetella pertussis, agent responsable de la coqueluche, a ete elucidee au sein de notre laboratoire. D'autres especes bacteriennes du meme genre : bordetella parapertussis et bordetella bronchiseptica sont impliquees dans la coqueluche ou responsable d'autres infections respiratoires. Une troisieme espece est pathogene chez les oiseaux : bordetella avium. Le but de notre travail etait de determiner la structure des endotoxines de ces trois bacteries dans le cadre d'une etude globale de relation entre structures et activites. Les resultats obtenus devant aider a la mise au point de tests de detection comme a la prevention des infections causees par ces pathogenes. En premier lieu, nous avons compare les endotoxines de b. Bronchiseptica, de b. Parapertussis et de b. Avium a la souche de reference b. Pertussis qui est de type rough constituee seulement de la structure i et ii. Les trois souches etudiees, sont de type smooth constituees des trois structures. Nous avons pu separer les lps avec et sans chaine-o specifiques presents dans une meme preparation. L'analyse par pdms des noyaux de trois souches de b. Bronchiseptica qui presentent des structures apparentees a celle de b. Pertussis, revele une variabilite due a la presence de groupes phosphates et dans le cas d'une souche de b. Bronchiseptica, la variabilite est due a l'absence d'un heptose. Les trois souches presentent une espece moleculaire commune de masse 1710 correspondant a l'espece nonasccharidique de b. Pertussis plus un phosphate. La spectrometrie de masse nous a permis de montrer que les noyaux lies au chaines-o n'etaient pas toujours identiques a ceux qui sont libres, ce qui est effectivement le cas de noyaux libres de b. Parapertussis et montre qu'il est injustifie d'extrapoler leur structure a celle des noyaux lies comme cela etait systematiquement realise dans la litterature. L'analyse de la structure fine des lipides a isoles des endotoxines de b. Bronchiseptica, de b. Parapertussis et partiellement celle de b. Avium a ete realisee. Des analyses chimiques, biochimiques et physiques (spectrometrie de masse de desorption par plasma et resonnance magnetique nucleaire) de ces lipides a, ont permis de montrer des similitudes importantes avec l'espece de reference b. Pertussis. Cependant chaque lipide a presente une structure fine differente et deux originalites de subsitutions, concernant les acides gras, ont pu etre mise en evidence pour la premiere fois.