Abstract FR:

Cette thèse présente l'étude comparative de la phosphofructokinase (PFK) de muscle strié de Jaculus orientalis, à l'état de normothermie et d'hibernation induite. Dans la première partie, nous avons purifié et caractérisé cet enzyme: c'est une protéine oligomérique dont le poids moléculaire est estimé à 340. 000 20. 000. Elle est constituée de quatre sous unités identiques, de poids moléculaire 80. 000 2. 000. Les deux enzymes, provenant de l'animal à l'état d'éveil (PFKE) et à l'état d'hibernation induite (PFKH) possèdent la même structure tétramérique et les mêmes caractéristiques chimiques et immunologiques. Elles se différencient cependant par leur activité maximale. Dans la seconde partie, les propriétés régulatrices de la PFK ont été abordées par des études cinétiques à l'état stationnaire de l'enzyme natif. L'enzyme présente une saturation coopérative vis-à-vis de son substrat, le fructose-6 phosphate ; il est soumis à une préinhibition par l'ATP. Son activité est modulée par les ions NH , K+, le pH, le phosphate inorganique, l'AMP, le fructose-2,6-diphosphate et le citrate, mais elle n'est pas régulée par l'ADP et le fructose-1,6-diphosphate. La PFKH procède qualitativement par le même mode de régulation, mais l'hibernation induite réduit la vitesse maximale et augmente systématiquement les Km apparents. Nous suggérons que ces changements dans les propriétés cinétiques sont dus à une phosphorylation de l'enzyme de l'hibernant. Cette modification covalente constituerait un mécanisme de régulation complémentaire pendant l'hibernation induite. Dans la troisième partie, l'évolution de divers métabolites régulant l'activité de la PFK, ainsi que les variations de quelques niveaux enzymatiques de la séquence glycolytique ont été étudiées. L'hibernation induite engendre des conditions qui sont en faveur de l'inhibition de la PFK, en particulier, et de la glycolyse dans le muscle de J. Orientalis. A la lumière de ces données, nous proposons, en conclusion un schéma formel de la régulation de la PFK de muscle strié chez J. Orientalis normotherme et en hibernation induite.