Petites gtpases rab : isoprenylation, localisation subcellulaire, et implication dans le transport intracellulaire
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Paris 7Disciplines:
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Les petites gtpases (22-26 kd) rab/ypt/sec4 appartiennent a la super-famille ras. La genetique chez s. Cerevisiae, puis de nombreuses etudes in vitro et in vivo, ont montre la localisation de ces proteines dans des compartiments specifiques, tout au long des voies de la secretion et de l'endocytose, et leur implication dans le transport intracellulaire. Nous avons recherche de nouvelles proteines rab localisees et impliquees dans la voie de la secretion entre le tgn et la membrane plasmique. Nous avons isole 3 adnc: rab8, rab11, et rab13. Les 3 proteines presentent un motif c-terminal (caax) different de ceux des proteines rab jusqu'alors connues. Le motif c-terminal permet aux proteines d'etre isoprenylees et, en consequence d'etre attachees a la membrane. Nous avons montre que rab8 et rab13 etaient geranylgeranylees ; rab11 incorpore le geranylgeranyl et le farnesyl in vitro. Par immunofluorescence, rab13 est retrouvee associee a des vesicles cytoplasmiques dans les cellules fibroblastiques, mais est detectee principalement au niveau des jonctions etroites dans les cellules epitheliales. Nous avons egalement etudie la localisation subcellulaire de rab3c et montre que cette proteine est associee a des structures vesiculaires cytoplasmiques. Ces structures marquees par l'anticorps anti-rab3c ne semblent pas correspondre aux endosomes, aux lysosomes, au tgn ou encore aux vesicules recouvertes par la clathrine