Abstract FR:

Ce manuscrit decrit des contributions a l'etude des activites nucleotidases des cellules vegetales. La hplc a ete utilisee pour la mesure de la charge energetique et les transformations des nucleotides lors du stress osmotique et de l'isolement des protoplastes. Cette technique permet de suivre la balance energetique des nucleotides et leur evolution simultanee dans differentes conditions. A partir de ces experiences, nous suggerons que l'integrite de la membrane plasmique et la regulation de la charge energetique doivent etre des indices importants pour l'etude de la regeneration des protoplastes. Puisque la vacuole est un organite regulateur de la pression osmotique, l'interaction entre les nucleotides adenyliques et le tonoplaste a ete soigneusement examinee par hplc. En plus de l'activite atpase, une nouvelle activite phosphotransferase est caracterisee sur cette membrane, qui permet la conversion de l'adp en atp et amp. Ce resultat illustre l'interet de la hplc dans l'enzymologie des nucleotides ou les methodes classiques ne permettent pas de detecter cette interconversion. Il a ete aussi demontre que le pyrophosphate est une source d'energie par inversion de l'activite atpase ne presence de l'adp. Les nucleotides non adenyliques, sont aussi hydrolyses par le tonoplaste et leur aptitude a generer le gradient de proton est compare a l'atp. Le gtp et l'itp sont significativement hydrolyses sans contribution importante au gradient de proton. Tous ces resultats, illustrent la complexite du metabolisme des nucleotides, en particulier dans le compartiment vacuolaire, et ouvrent de nouvelles perspectives dans la regeneration et la culture des protoplastes