Abstract FR:

La levure saccharomyces cerevisiae est un organisme privilegie pour l'etude de mecanismes de regulation de proteines eucaryotiques. De nombreuses chaines de biosynthese sont regulees, en general au niveau de leur premiere activite enzymatique, par leurs produits finaux, par des mecanismes de retroinhibition ou activation. Ces proteines regulees sont tres souvent des enzymes allosteriques. En particulier, la proteine carbamylphosphate synthetase-aspartate transcarbamylase (cpsase-atcase) de la levure codee par le gene ura2, qui catalyse les deux premieres etapes de la chaine de biosynthese des pyrimidines, est retroinhibee par l'utp, produit final. Dans le but d'etudier ce type de regulation, nous avons developpe un systeme de selection in vivo de mutants du gene ura2 insensibles a la retroinhibition. 18 mutants ont ete selectionnes et sequences: 5 d'entre-eux sont localises dans le domaine cpsase et 13 dans le domaine atcase. Toutes les mutations sont ponctuelles et faux-sens et conduisent au changement d'un seul acide amine. Quelles que soient leurs positions dans la proteine, les deux activites cpsase et atcase ne sont plus retroinhibees, ce qui suggere l'existence d'un mecanisme commun de regulation de ces deux fonctions. Les mutations situees dans la partie atcase sont regroupees dans deux domaines bien definis sur le modele de l'atcase d'e. Coli qui pourraient correspondre soit au site de fixation de l'utp lui-meme, soit a des acides amines de transmission du signal du ou des sites de fixation de l'utp au site catalytique