Structures et sequences des genes de la caseine beta et de la wap de lapin. Recherche in vitro et in vivo d'elements regulateurs sur le gene de la wap
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Apres avoir etabli les sequences des genes de la wap et de la caseine beta de lapin, la presence d'elements regulateurs en amont du site d'initiation de la transcription du gene de la wap a ete recherchee in vivo et in vitro. Les genes des hormones de croissance humaine ou bovine ont ete places sous la dependance des 6300 premieres paires de bases en amont du gene de la wap. Ces genes chimeres ont ete utilises pour obtenir des souris transgeniques. L'hormone se retrouve dans le lait des souris de toutes les lignees examinees, a une concentration elevee (superieure a 1 mg/ml) dans 13 cas sur 14. La glande mammaire est le site majeur d'expression du transgene. Dans certaines lignees, l'expression du transgene est limitee a la glande mammaire en fin de gestation et en lactation, et est donc strictement parallele a celle du gene wap endogene. Cependant, dans la majorite des lignees, il existe une faible expression ectopique du transgene. L'expression du gene cat place sous la dependance de longueurs variables de sequences situees en amont du gene de la wap, a ete etudiee apres transfection dans des cellules epitheliales mammaires primaires ou dans des cellules de la lignee mammaire hc11. Deux regions importantes, respectivement situees entre 1,8 et 3,0 kb et entre 3,0 et 6,3 kb, ont ainsi ete identifiees. De la meme facon, la presence d'elements de reponse aux glucocorticoides dans les 1800 premieres parties de bases, et d'elements de reponse a la prolactine dans les 3000 premieres paires de bases a ete mise en evidence