Abstract FR:

Nous avons genere une serie de clones d'adnc couvrant la totalite des genomes des deux souches du virus de theiler et avons reconstruit a partir de ces clones deux plasmides complets infectieux pour les deux virus. A partir de ces plasmides, nous avons synthetise des arn infectieux qui, apres transfection dans des cellules permissives au virus, ont permis de produire de nouvelles particules virales. Ces particules ont induit chez les souris les maladies typiques de chacune des souches, comme lors de l'infection naturelle. Nous avons ensuite produit une serie de chimeres entre les deux virus afin de les inoculer aux souris sjl/j. L'histopathologie des maladies induites par ces chimeres a ete etudiee en utilisant les techniques d'hydridation in situ et d'immunocytochimie. Nous avons ainsi determine que la capacite du virus de theiler a persister et a entrainer une maladie demyelinisante est liee a une petite region du genome codant pour la proteine vp1 de la capside. D'autre part, l'adnc du virus da, delete de ses extremites non codantes, a ete clone dans un vecteur d'expression. Cette construction a permis d'etablir une lignee de cellules transfectees de maniere stable qui expriment la polyproteine virale. Ces cellules ont ete utilisees comme cibles dans des tests de lyse par les lymphocytes spleniques totaux obtenus a partir de souris dba/2 infectees par le virus de theiler. Ces experiences ont montre l'existence, au cours de cette infection, d'une reponse cytotoxique de type ctl restreinte aux antigenes de classe i du cmh et mediee par des cellules cd8#+