Abstract FR:

La culture d'hepatocytes a long terme constitue un modele de choix pour des etudes des fonctions hepatocytaires et des etudes toxicopharmacologiques. Les interactions cellulaires jouent un role fondamental dans le maintien de l'expression des fonctions de l'hepatocyte. La culture d'hepatocytes en spheroides permet aux cellules de reconstituer in vitro une cyto-architecture en trois dimensions ou les interactions cellulaires sont au maximum. Dans ce travail, nous avons etudie le systeme de culture en spheroides dans differentes conditions de culture afin d'ameliorer l'etat differencie de l'hepatocyte in vitro. Les hepatocytes de rat nouveau-ne, de rat adulte et de l'humain ont ete successivement cultives sous forme de spheroides dans le milieu de culture basal ou le milieu hormono-defini et leurs fonctions specifiques ont ete etudiees aux differents jours jusqu'a 1 a 2 mois de culture. Les hepatocytes, que ce soient des hepatocytes de rat ou humains, sont capables de former des spheroides lorsqu'ils sont cultives sur un support couvert de poly-hema. La culture en spheroides avec le milieu hormono-defini permet aux hepatocytes de maintenir leur capacite de secreter l'albumine et la transferrine au moins jusqu'a 2 mois de culture. En plus, l'expression de certains genes par ces spheroides hepatocytaires est regulable par des facteurs specifiques. L'il-6 peut augmenter la production d'#2-macroglobuline. La synthese du cytochrome p450 ia1 peut etre induite par le 3-methylcholanthrene. Les etudes du metabolisme de certains xenobiotiques (lidocaine et phenol) montrent que ces enzymes du metabolisme de phase i et de phase ii sont bien fonctionnels dans les hepatocytes ainsi cultives. Les etudes morphologiques demontrent que les hepatocytes adjacents forment des canalicules biliaires au sein des spheroides meme apres 1 mois de culture. Enfin, la diminution des fonctions specifiques de l'ensemble des spheroides au cours de la culture pourrait etre due a la necrose partielle des cellules au milieu des spheroides et non a la dedifferenciation cellulaire. Les resultats presentes dans cette these montrent que le systeme de culture en spheroides offre une nouvelle voie pour des etudes des fonctions hepatocytaires et des etudes toxico-pharmacologiques. Il est egalement tres utile pour realiser des experiences sur la transplantation des hepatocytes