Etude de l'expression de transgenes vehicules par differents types de vecteurs dans des lignees cellulaires porcines
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Au cours de cette etude, nous avons exploite la possibilite de faire exprimer des molecules recombinantes par des cellules porcines avec differents vecteurs. Les applications distinctes sont presentees independamment. 1) application a l'expression d'un gene marqueur pour l'etude de l'infection d'un retrovirus recombinant xenotropique. L'expression du gene lacz permet de quantifier l'infection du retrovirus recombinant mmulvsvnlslacz. Nous avons pu montrer que l'infection des cellules porcines par ce virus xenotropique n'etait pas favorisee par un ph acide ni modifiee avec des agents lysosomotropiques. 2) application a l'expression d'oncogenes viraux pour developper des lignees de cellules vasculaires. L'expression des genes immortalisants du plasmide psv3neo nous a permis d'etablir des lignees de cellules vasculaires porcines apres transfection des cellules primaires. Le mode d'integration du vecteur a ete etudie et nous presentons la recherche de caracteres specifiques pour cinq clones. Quatre exprimaient des marqueurs de cellules endotheliales et lautre des marqueurs de cellules musculaires lisses. 3) application a la production d'interferon gamma porcin par des lignees cellulaires porcines. L'adnc de l'ifn gamma etait insere dans le vecteur bcmgshyg. Apres transfection, des cellules productrices d'ifn actif (antiviral et antiproliferatif) ont ete obtenues