Abstract FR:

Pour etudier la replication de l'adn eucaryote, nous avons choisi comme systeme modele la levure s. Pombe. Dans un premier temps, nous nous sommes interesses a la structure du gene codant pour une enzyme cle de ce processus: la sous-unite catalytique de l'adn polymerase delta. Nous avons caracterise ce gene au niveau de sa sequence nucleotidique et nous avons realise des anticorps specifiques diriges contre une partie du produit de ce gene. L'utilisation du gene et des anticorps nous a permis, dans un deuxieme temps, de nous interesser a sa fonction et a son expression. Disposant du gene de la sous-unite catalytique de l'adn polymerase alpha de s. Pombe caracterise par ailleurs au laboratoire et d'anticorps diriges specifiquement contre cette proteine, nous nous sommes egalement interesses a la fonction et a l'expression de ce gene. Les resultats obtenus montrent: 1) les deux anticorps inhibent de maniere additive l'activite polymerase dans un extrait de s. Pombe. 2) la comparaison des sequences proteiques et les reactions des anticorps font apparaitre une tres forte conservation des levures aux mammiferes. 3) l'expression des pol alpha et delta de s. Pombe a montre: a) la pol delta exprimee chez e. Coli est toxique pour la bacterie. B) l'expression des pol alpha et delta dans des cellules d'insecte a l'aide de baculovirus recombinants permet d'obtenir des enzymes actives. C) l'etude de la surexpression des pol alpha et delta chez s. Pombe suggere des mecanismes de regulation de l'expression differents