Abstract FR:

Le recepteur orl1 (opioid receptor-like 1) est un recepteur couple aux proteines g presentant de fortes identites avec les recepteurs aux opioides , et. Son ligand endogene, la nociceptine, est un peptide de 17 acides amines dont la structure est proche de celle de la dynorphine a, ligand endogene du recepteur. Ce nouveau systeme neuropeptidergique presente de nombreux interets therapeutiques (douleur, anxiete). L'objectif de ce travail de these a ete l'etude de l'architecture fonctionnelle du recepteur orl1, c'est a dire l'identification des determinants structuraux necessaires a son interaction avec la nociceptine et a son activation. La modelisation moleculaire du complexe ligand-recepteur a suggere que la partie n-terminale du ligand se liait dans une poche transmembranaire formee par les helices 3, 5, 6 et 7 du recepteur alors que la partie centrale basique interagissait avec les boucles extracellulaires 2 et 3. La construction de chimeres de recepteurs orl1 et -opioide a montre le role primordial de la seconde boucle extracellulaire d'orl1 dans l'activation par la nociceptine alors que cette meme boucle ne semble pas impliquee dans l'activation du recepteur -opioide par la dynorphine a. Une etude de mutagenese dirigee a confirme que la poche transmembranaire du recepteur contenait des acides amines importants pour la liaison du ligand, notamment l'aspartate 130 de l'helice 3 et la phenylalanine 224 de l'helice 5. Elle a aussi permis de montrer que la glutamine 286 situee a l'extremite n-terminale de l'helice 6 etait necessaire a l'activation du recepteur. La technique de marquage d'affinite a enfin permis de delimiter une zone d'interaction entre le centre basique de la nociceptine (residu 10) et les boucles extracellulaires du recepteur. Ces divers resultats experimentaux sont en accord avec le modele d'interaction ligand-recepteur propose et fournissent des bases structurales pour la conception rationnelle de nouveaux ligands du recepteur orl1.