thesis

Embryogenese somatique chez daucus carota l. Essais de caracterisation de l'aptitude embryogene par quelques parametres biochimiques. Etude en bioreacteur des effets de l'oxygene et du ph

Defense date:

Jan. 1, 1992

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Institution:

Clermont-Ferrand 2

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Une etude comparative de suspensions cellulaires de carotte aux potentialites embryogenes differentes a ete realisee a l'aide de quelques parametres physiologiques et biochimiques afin de mettre en evidence des marqueurs potentiels de la capacite embryogene. Au cours de la phase de proliferation, les quantites de biomasse seche produite, l'evolution du ph du milieu de culture, les cinetiques d'absorption de l'ion ammonium et des sucres, les teneurs en atp intracellulaires et les ph intracellulaires ne dependent pas de l'aptitude embryogene des cellules. Par contre, des differences d'ordre quantitatif et qualitatif quant a l'expression de l'alcool deshydrogenase et de la glutamate deshydrogenase ont pu etre mises en relation avec le potentiel embryogene. Il a aussi ete constate qu'une faible production d'ethanol caracterise des cellules aptes a produire en grande quantite des embryons capables d'evoluer en plantules. Des le transfert dans le milieu depourvu de 2,4 d, la differenciation des amas proembryonnaires s'accompagne d'une diminution de l'activite alcool deshydrogenase et d'une expression differentielle des isoenzymes alcool deshydrogenases caracteristiques des capacites plus ou moins embryogenes des suspensions. Dans ces conditions de culture, la souche non embryogene degenere rapidement. Les effets de la teneur en oxygene dissous et du ph du milieu de culture sur le processus d'embryogenese ont ete recherches. Au cours de la phase de proliferation une bonne viabilite cellulaire est assuree par de faibles teneurs en o#2 (10%) mais celles-ci s'averent inhibitrices de la production embryonnaire comparativement a des conditions ou l'oxygenation est de 100% ou non regulee. Le maintien d'un ph tres acide (4,3) stimule la production d'embryons mais inhibe leur developpement au-dela du stade cur alors qu'un ph plus eleve (5,8) a un effet inverse