Abstract FR:

L'objectif de la presente these etait d'etudier si le pagc (ou cgrp) et l'amyline (ou iapp) regulent la secretion d'insuline et l'expression du gene de l'amyline dans la cellule b. Nous avons mis en evidence des sites de liaison specifiques du pagc dans les membranes d'insulinomes de hamster et les cellules rinm5f. Dans les deux modeles, les recepteurs lient preferentiellement le pagc de poulet et faiblement l'amyline. Dans les membranes d'insulinome de hamster, deux proteines (38 et 18 kda), couplees a une proteine g, liant specifiquement le pagc ont ete identifiees. Le pagc et l'amyline ont un double effet sur la secretion d'insuline selon la lignee b etudiee. A faible concentration, seul le pagc de poulet inhibe la secretion d'insuline dans les cellules rinm5f, tandis que dans les cellules btc1, seule l'amyline a un effet inhibiteur. Toutefois, a forte concentration, le pagc et l'amyline stimulent la secretion d'insuline dans les deux lignees. Cette stimulation est concomittante a une accumulation d'ampc suggerant que la stimulation de la secretion d'insuline par le pagc et l'amyline est couplee a la voie de signalisation dependant de l'ampc. Par ailleurs, le mecanisme de l'effet inhibiteur reste a definir. Par ailleurs, nous avons montre que l'expression du gene de l'amyline est regulee positivement par le glucose dans les cellules btc1 et negativement par l'amyline et le pagc dans les deux lignees. De plus, l'ampc semble reguler differemment l'expression du gene de l'amyline et de l'insuline dans les cellules btc1. Il a ete decrit que l'activite du promoteur du gene de l'amyline est tres importante dans les cellules btc, ainsi ces cellules seraient un bon modele pour isoler les facteurs de trans-activation qui se lient sur les elements de transcription. Par ailleurs, les fonctions directes du pagc et de l'amyline in vivo pourraient etre abordees par inactivation de leurs genes dans les cellules souches embryonnaires de la souris