Abstract FR:

Une methode de dosage antigenique du pai-1 a ete developpee: 90% du pai-1 circulant se localise dans les plaquettes (0,7 fg/plaquette). Dans le plasma, le pai-1 est sous forme active. Dans le milieu conditionne de cellules endotheliales le pai-1 est sous forme inactive. Chez des sujets avec activite pa inhibitrice elevee, les taux de pai-1 sont augmentes. Avec des dosages antigeniques du tpa, du pai-1 et des complexes pai-1/t-pa, il a ete montre qu'a l'etat basal 40% du t-pa est lie au pai-1. Le facteur limitant de la formation du complexe pai-1/t-pa est la concentration plasmatique de t-pa. Apres occlusion veineuse, cette formation depend du pai-1 actif. Aucune liberation de pai-1 actif n'est provoquee par l'occlusion veineuse. Les formes du pai-1 ont ete separees par gel filtration a partir de milieu conditionne de cellules endotheliales veineuses ombilicales et de cellules eucaryotes exprimant le pai-1. La forme inactive a ete purifiee par chromatographie sur zinc chelate sepharose, gel filtration et immunoadsorption sur anticorps monoclonal antipai-1. La forme active du pai-1 represente l'association d'une molecule de pai-1 a un multimere de vitronectine. La demi-vie de l'activite pa inhibitrice a ete multipliee par deux en presence de vitronectine. Cette derniere n'accelere pas la vitesse d'inactivation du t-pa par le pai-1 (k1=3 10#7 m##1s##1). L'analyse des formes du pai-1 dans le plasma chez des sujets temoins a montre trois pics antigeniques. Les deux premiers ont ete reconnus par le dosage des complexes pai-1/vitronectine. Chez les sujets avec elevation de l'activite pa inhibitrice plasmatique les trois pics de pai-1 antigene ont ete observes, d'intensite superieure a ceux obtenus chez les temoins. L'activiation plaquettaire in vivo ou in vitro est responsable d'une liberation de pai-1 sous forme inactive (50 kd). L'ajout de t-pa a du plasma in vitro ou in vivo est responsable d'un