Métabolisme purique chez le pécher. Recherche d'enzymes marqueurs de potentialités de croissance des bourgeons : étude de l'adénine phosphoribosyltransferase et de l'adénosine nucleosidase
Institution:
Clermont-Ferrand 2Disciplines:
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Abstract FR:
Chez les plantes pérennes, il existe une relation entre la régulation du contenu en nucléosides triphosphates après un traitement exogène à l'adénosine et l'aptitude à la croissance des bourgeons (test nucléotides). Chez le pécher, l'adénosine exogène est préférentiellement recyclée en nucléotides adenyliques par une voie indirecte faisant intervenir une adénosine nucleosidase et une adénine phosphoribosyltransferase. Pendant plusieurs périodes automno-hivernales successives, l'examen de l'activité de ces enzymes a été réalisé au niveau des bourgeons végétatifs et floraux de cette espèce végétale. Un accroissement de l'activité adénosine nucleosidase des le mois d'octobre suivi d'une décroissance rapide en décembre, au moment de la levée de dormance, a été constaté. Cette baisse d'activité spécifique n'ayant pas lieu en conditions de privation de froid, l'activité adénosine nucleosidase peut être considérée comme un marqueur de la levée de dormance des bourgeons de pécher. L'activité aprtase augmente régulièrement dans les deux types de bourgeons du mois d'octobre au mois de février ou mars, ou elle atteint un maximum. Cette évolution fait d'elle un marqueur potentiel de la période de post-dormance des bourgeons. Afin de préciser les rôles respectifs de ces enzymes, leurs purifications ont été entreprises, mais seule l'aprtase a pu être purifiée à homogénéité et faire l'objet d'une étude plus approfondie. Sa masse moléculaire est estimée à 27,0 0,1 kda. Son ph optimal d'activité est de 8,5 et sa vitesse de réaction dépend strictement de la présence de cations divalents (mn 2 + > mg 2 +). Elle présente de fortes spécificité et affinité vis à vis de l'adénine (km = 0,74 m), mais des cytokinines comme la zeatine (km = 0,3 mm) et la benzyladenine sont également des substrats potentiels. Le km mesure vis à vis du prpp est de 20 m. L'adp et l'amp sont seuls inhibiteurs de la réaction, l'inhibition par l'amp étant de type compétitif vis à vis du prpp. L'obtention d'anticorps polyclonaux anti-aprtase de pécher a permis d'effectuer en parallèle des mesures de la quantité d'enzyme présente dans les bourgeons pendant la période automno-hivernale. Cette étude démontre que l'élévation de l'activité spécifique aprtase observée au cours de cette période est corrélée à une synthèse accrue de l'enzyme dans les bourgeons végétatifs et floraux. Grace à l'utilisation des anticorps, une observation des évolutions de la localisation intra tissulaire de l'enzyme a également été réalisée. Une forte présence d'aprtase dans le tissu sous-jacent au bourgeon, confirmée par la mesure d'une activité spécifique élevée dans ce territoire, caractérise un bourgeon végétatif dormant. Un marquage intense au niveau des anthères en décembre correspond au moment où apparait la méiose du bourgeon floral. Ces résultats ont permis une meilleure appréhension des rôles respectifs de l'adénosine nucleosidase et de l'adénine phosphoribosyltransferase dans le déterminisme physiologique de la dormance