Abstract FR:

Le mecanisme catalytique au site fructose de la glucosamine-6p synthase (glms), enzyme cle de la voie de biosynthese des microorganismes, a ete etudiee. Cette approche necessite la synthese d'analogues du fructose-6p et leur evaluation comme inhibiteurs (reversibles ou irreversibles). Le 2-amino-2-desoxy-glucitol-6p est le meilleur inhibiteur competitif du site fructose. Le comportement de quatre analogues bisubstrats contenant une partie 2-amino-2-desoxy-glucitol-6p et une partie glutamine a apporte des arguments en faveur d'un des trois mecanismes postule pour le transfert de l'azote de la glutamine au fructose-6p. La strategie developpee dans la synthese de l'inhibiteur irreversible, l'anhydro-1,2-d-glucitol-6p (13 etapes), a permis la synthese de la molecule de haute radioactivite specifique. L'etude par rmn du 2-#1#3c-fructose-6p et de la glms a mis en evidence une activite glucose-6p synthase de la glms localisee dans le domaine carboxyterminal, pour lequel aucune autre activite n'avait pu etre detectee jusqu'alors. L'etude de cette activite (inhibition, mutagenese dirigee) a permis de proposer un mecanisme rendant compte des deux activites glucose-6p et glucosamine-6p synthase dans ce site