Abstract FR:

Pour contribuer a la definition des domaines structuraux et fonctionnels de la carbamyl phosphate synthetase d'escherichia coli, nous avons entrepris une analyse mutationnelle de cette enzyme. L'etude de l'effet de deletions sur la formation de l'heterodimere montre que le tiers amino-terminal de la sous-unite glutaminase, ainsi que deux domaines de la sous-unite synthetase, sont impliques dans l'interaction entre les deux sous-unites. Les deux domaines d'interaction situes sur la sous-unite synthetase sont homologues entre eux et sont adjacents aux deux sites atp. L'etude des proprietes catalytiques d'un enzyme portant une substitution du glutamate 841 par une lysine montre que le glutamate 841, situe sur un des deux sites atp de la sous-unite synthetase, est un residu essentiel pour la phosphorylation du carbamate, et suggere l'existence d'interactions entre les deux sites atp qui coupleraient la formation de carbamate et sa phosphorylation. Ces travaux permettent de completer la carte des domaines structuraux et fonctionnels de la carbamyl phosphate synthetase, de suggerer l'existence d'un unique site catalytique ainsi qu'un modele de conformation tridimensionnelle, et confirment la theorie d'evolution proteique par l'assemblage de domaines globulaires independants