Abstract FR:

Le neutrophile exerce son activite bactericide par le biais de trois mecanismes: phagocytose, generation d'o2#- par la nadph oxydase et liberation de proteines bactericides et proteolytiques par degranulation. Au cours des maladies inflammatoires chroniques, l'activation des phagocytes echappe a tout controle negatif, entrainant ainsi la destruction des tissus environnants. L'objectif de notre equipe est d'identifier des proteines impliquees dans ces processus d'activation afin d'envisager leur inhibition. Au cours de ma these, je me suis interessee au complexe enzymatique nadph oxydase. L'activation de cette enzyme implique la translocation des sous-unites de l'enzyme depuis les granules et le cytosol vers la membrane plasmique, et est dependant ducalcium et du gtp. Ceci m'a conduit a etudier l'annexine iii (ax iii) et la petite proteine g p21rac. L'ax iii appartient a une famille de proteines dont plusieurs membres sont impliques dans la fusion membranaire dependante du calcium. Les resultats obtenus montrent que 1) l'ax iii est exprimee sous deux formes distinctes dans les neutrophiles et monocytes, 2) elle est associee a des granules cytoplasmiques dans les cellules au repos, et transloque vers la membrane plasmique ou periphagosomale au cours de l'activation, suggerant un role de cette proteine dans la degranulation. La proteine p21rac est la derniere sous-unite cytosolique decrite de la nadph oxydase. Nous montrons que, contrairement aux autres composantes de l'enzyme, p21rac ne s'associe pas au complexe assemble a la membrane plasmique, mais serait impliquee dans le ciblage des autres constituants cytosoliques de la nadph oxydase. Enfin, nous avons identifie un inhibiteur de la nadph oxydase, l'oxyde de phenylarsine (pao) qui agit en se liant a des groupements sulfhydryls voisins presents sur une proteine membranaire necessaire a l'activite de l'enzyme. Le pao constitue le premier inhibiteur complet et reversible de la nadph oxydase et represente un agent anti-inflammatoire potentiel