Abstract FR:

Il a été montré que le diabète augmentait l'expression des CYP 2E1 et 2B1 de rat au niveau ARN et protéines. Cette élévation a été attribuée à une stabilisation des ARNm et peut être inversé par un traitement quotidien à l'insuline. En utilisant une lignée d'hépatome de rat, il a été précédemment montré au laboratoire que cette hormone agissait par un mécanisme post-transcriptionnel en diminuant la durée de vie des messagers des CYP2E1 et 2B1 de rat. Nous avons entrepris d'identifier les mécanismes moléculaires mis en jeu dans cette régulation. En utilisant des protéines cytoplasmiques provenant de cellules d'hépatome de rat traitées ou non avec l'insuline (10-7 M) et l'ARNm entier des CYP2E1 ou 2B1 marqué au 32P comme sonde, nous avons, par des expériences de protection à la RNase T1, mis en évidence un complexe majoritaire ARN/protéines. Grâce aà des fragments de ces ARNm puis des expériences de compétition avec des oligonucléotides antisens complémentaires, le site de liaison des protéines a été localisé pour chacun des CYP sur une séquence de 16 nucléotides, présentant entre-elles une homologie de 80%. . . .