Le fer chez erwinia chrysanthemi 3937 : etude du gene fct codant le recepteur de la ferrichrysobactine, et role du fer dans la regulation de l'expression des pectate lyases
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Paris 6Disciplines:
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L'enterobacterie erwinia chrysanthemi souche 3937 provoque le symptome de pourriture molle sur son hote saintpaulia ionantha. Le developpement de la maladie requiert la production d'enzymes pectinolytiques, notamment cinq pectate lyases (pla a ple), et un systeme d'assimilation du fer a haute affinite base sur la production d'un siderophore de type catechol, la chrysobactine. L'operon fct-cbsceba code le recepteur de membrane externe de la ferrichrysobactine (fct) et des enzymes de biosynthese de la chrysobactine. Cette bacterie produit un second siderophore, l'achromobactine. Les mutants de transport de la ferriachromobactine (cbr) ont la particularite de produire la chrysobactine en conditions normalement repressives. Nous avons mis en evidence, par des tests de pouvoir pathogene, que des bacteries cultivees en carence en fer sont plus agressives. En revanche, l'apparition et la propagation des symptomes sont retardees avec les mutants cbr. L'etude in vitro de fusions pel::gus nous a permis de montrer que l'expression des genes pelb, pelc et pele est stimulee en conditions pauvres en fer, mais pas dans les mutants cbr. Nous nous sommes interesses ensuite a l'operon fct-cbsceba. La sequence de la region promotrice et du gene fct a ete realisee. La region promotrice presente une forte ressemblance avec les promoteurs divergents des operons fepa-entd et fes-entf d'e. Coli, impliques dans l'assimilation du fer via l'enterobactine. Nous avons montre qu'un gene similaire au gene fes d'e. Coli se trouve en orientation inverse de fct. Un site consensus du represseur fur chevauche la region promotrice et une fusion fct::lacz est regulee par fur chez e. Coli. Fct presente 36% d'identite avec le recepteur du ferrichrome fhua d'e. Coli et le recepteur de la ferrioxamine foxa de yersinia enterocolitica. Des predictions de structure secondaires et l'alignement de fct, fhua et foxa nous ont permis de proposer un modele de l'arrangement de fct dans la membrane externe