Abstract FR:

L'endotheline (et) est un puissant peptide vasoconstricteur isole en 1988 du surnageant de cellules endotheliales vasculaires. Il existe trois isoformes se liant a deux sous-types de recepteurs couples au proteines g (rcpg). L'un (et#a) est selectif pour et-1 relativement a et-3, le second (et#b) est non selectif. L'interpretation d'etudes in vivo ou sur tissus est limitee par le manque de donnees sur les recepteurs endogenes. Des lignee cellulaires exprimant chacun des recepteurs recombinants ont ete utilisees pour caracteriser leur proprietes pharmacologiques et fonctionnelles. Nous avons ainsi pu estimer les constantes cinetiques et d'equilibre (k#d) de la liaison et-1/et#a (env. 20pm). Les valeurs publiees pour k#d couvrent une large fourchette (du pm au nm) alimentant le debat autour de sous-classes a l'interieur de chacun des deux sous-types. Nous avons envisage les implications fonctionnelles de ces valeurs et d'une aussi haute affinite. Differentes causes de distorsion dans la mesure de cette affinite ont egalement ete examinees. La pharmacologie voit frequemment une multitude de sous-types la ou la biologie moleculaire ne montre qu'un nombre limite de genes (ici deux). Nous nous sommes interesses a un de ces sous-types putatifs exprime dans des tissus montrant un profil pharmacologique et#a associe a une haute affinite pour et-3. L'utilisation de differents radioligands a permis de montrer que le recepteur et#a clone est bien capable d'interaction de haute affinite avec et-3. Nos observations concernant cette derniere interaction s'interpretent difficilement dans le cadre des modeles classiques pour les rcpg. Nous avons ainsi ete conduits a explorer des modeles plus sophistiques a plusieurs etats du recepteur. Pour les mettre a l'epreuve, l'interaction recepteur/proteine g a ete perturbee par mutagenese dirigee dans la troisieme boucle intracellulaire (ala#3#0#5/et#a). Des signes d'activation constitutive ont ete observes chez le mutant leu#3#0#5et#a.