thesis

Contribution a la detection et a la caracterisation de deux closterovirus, le grapevinevirus a (gva) et le grapevine leafroll-associated virus 1 (glrav 1), agents impliques dans deux maladies de la vigne : les cannelures du tronc et l'enroulement

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Jan. 1, 1994

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Dans cette these sont presentes les travaux visant a ameliorer les conditions de detection de deux closterovirus de la vigne, le virus a (gva) et le virus 1 associe a l'enroulement de la vigne (glrav 1), a demontrer le role du gva dans l'etiologie d'un syndrome de cannelures du tronc, le kober stem grooving (ksg), et a voir des relations entre la multiplication des virus et le niveau d'expression des symptomes de cannelures. Une technique de tres haute sensibilite, basee sur l'amplification genique (pcr) d'un fragment de genome du gva precedee d'une etape d'immunocapture du virus, a ete adaptee a la detection du virus dans la vigne. Pour le glrav 1, la sequence primaire de l'extremite n-terminale de sa coque proteique a ete determinee pour la production d'amorces specifiques pour la synthese et le clonage d'adn complementaire au rna viral, necessaires a sa detection par pcr. La recherche par pcr du gva dans des vignes malades et/ou traitees par thermotherapie a demontre l'etroite correlation entre la presence du gva et le ksg ; l'inoculation du gva a la vigne par heterogreffage in vitro sur n. Benthamiana infecte a entraine le developpement de symptomes sur le porte-greffe sensible kober 5bb, ce qui a confirme l'implication du gva dans l'etiologie du ksg et a montre que le ksg restait latent sans greffage. La detection in situ du gva par immunomarquage de coupes de tiges de kober 5bb infecte n'a revele aucune difference quantitative dans sa multiplication avant et apres greffage, mais que la surinfection par le glrav 1, accentue la severite des symptomes de ksg