Abstract FR:

Les 22 arnt mitochondriaux (arnt mt) sont indispensables a la synthese des 13 proteines codees dans l'adn mt. Ils sont peu connus, et un objectif de cette these a ete d'etudier leurs caracteristiques structurales et fonctionnelles (volet 1). Certaines mutations dans les genes d'arnt mt entrainent des myopathies et encephalopathies. La comprehension des mecanismes moleculaires impliques constitue le second objectif de cette these (volet 2). A partir de mitochondries de placenta humain, nous avons isole des arnt mt naturels et des aminoacyl-arnt synthetases (aars) mt. Par ailleurs, des arnt mt correspondant a 7 couples (sauvage/mutants) ont ete prepares par transcription in vitro, afin de les comparer sur les plans structural et fonctionnel. Nos resultats indiquent un role particulier des bases modifiees dans la structure et la fonction des arnt mt humains. Resultats. Volet 1 : l'aminoacylation in vitro des transcrits sauvages par les aars mt n'a fonctionne que pour le transcrit de l'arnt#i#l#e (cinq autres transcrits, specifiques des systemes gly, lys, leu, ser et thr ne sont pas aminoacylables). Ceci indique un role probable des bases modifies. L'analyse structurale des transcrits de l'arnt#l#y#s montre qu'ils adoptent une structure 2-d anormale, en forme d'epingle a cheveux, au lieu d'une feuille de trefle. Cette structure est impossible dans l'arnt naturel en raison de la presence d'une base modifiee, un m#1a9. Les transcrits de l'arnt#l#e#u#(#u#u#r#) ont ete micro injectes dans l'ovocyte de xenope et 8 bases modifiees differentes sont apparues. Le transcrit sauvage de l'arnt#p#r#o mt est un bon substrat pour la trna-g37-methyl transferase d'e. Coli. . Volet 2 : impact des mutations : la mutation a3243g dans le gene de l'arnt#l#e#u#(#u#u#r#) ne perturbe pas le profil de maturation post-transcriptionnelle, les mutations a4269g et a4317g affectent faiblement l'aminoacylation de l'arnt#i#l#e et la mutation c15990t dans le gene de l'arnt#p#r#o inhibe tres fortement la methylation du nucleotide g37.