Abstract FR:

L'aspartate transcarbamylase d'escherichia coli (atcase, e. C. 2. 1. 3. 2) catalyse la carbamylation de l'aspartate par le carbamyl phosphate, pour aboutir au carbamyl aspartate, premier metabolite specifique de la voie de biosynthese des pyrimidines chez les procaryotes. Dans un premier temps, nous avons montre que le carbamyl phosphate, premier substrat de cette enzyme allosterique, ne se fixe pas de facon cooperative aux sites catalytiques. La sigmoidicite apparente des courbes de saturation de l'atcase par ce substrat n'est en fait qu'un artefact resultant de la fixation cooperative du second substrat, l'aspartate. Ensuite, grace a l'etude des consequences sur les proprietes ph-dependantes de l'enzyme de la substitution par l'alanine de l'histidine 134, un acide amine du site actif, il a ete possible d'etablir que ce residu ne semble jouer qu'un role limite dans la fixation du carbamyl phosphate et n'intervient pas directement dans l'acte catalytique. Finalement, l'etude des interactions entre differents nucleotides pyrimidiques, aussi bien au niveau de la fixation (par la methode de dialyse a flux continu) que de leur effet sur l'activite enzymatique, a permis de montrer que le mecanisme de l'inhibition synergique de l'activite de l'atcase par le ctp et l'utp met en jeu, d'une part, des interactions homotropiques positives et negatives entre les sites allosteriques adjacents appartenant a un meme dimere regulateur, et d'autre part, des interactions heterotropiques entre sites allosteriques et sites catalytiques. De plus, les signaux emis lors de la fixation, respectivement, du ctp et de l'utp n'empruntent pas les memes voies