Abstract FR:

La melanine, pigment noir de haut poids moleculaire synthetise par certains champignons phytopathogenes (pyricularia oryzae ou verticillium dahliae), semble essentielle pour l'infection de l'hote par le champignon. Sa biosynthese comporte une serie de reductions-deshydratations correspondant globalement a deux deshydroxylations de polyphenols. Le 1,3,6,8-tetrahydroxynaphtalene (t#4hn) est deshydroxyle en 1,3,8-trihydroxynaphtalene (t#3hn) via la scytalone. Le passage t#3hn 1,8-dihydroxynaphtalene (dhn) se fait de meme via le vermelone. Le dhn etant le precurseur de cette melanine. Les systemes enzymatiques impliques dans les etapes de reduction n'ont pas encore ete purifies, ni caracterises. Nous avons etudie la naphtol reductase impliquee dans la reduction du t#4hn et du t#3hn. Pour cela, nous avons realise, dans un premier temps, une synthese totale des substrats et des produits de reduction de l'enzyme. Nous avons ensuite realise la purification a l'homogeneite de la naphtol reductase de pyricularia oryzyae et son etude cinetique a permis d'eclaircir le mode d'action du tricyclazole en tant qu'inhibiteur. Nous avons egalement examine le mecanisme de la reduction, en etudiant, dans un premier temps, la stereospecificite de l'enzyme par rapport a son cofacteur, le nadph (etude du transfert d'hydrure a partir de nadph stereospecifiquement deuteres), puis par rapport aux substrats, en determinant la configuration absolue par correlation chimique, de la scytalone et de la vermelone. Nous avons ainsi pu montre que l'enzyme est une deshydrogenase nadph dependante, transferant l'hydrogene pro s du nadph sur la face si du carbonyle d'une forme tautomere cetonique du t#4hn ou t#3hn