Abstract FR:

Pbla8, plasmide cryptique de 7,5 kb issu de brevibacterium linens atcc 19391, possede un spectre d'hotes etroit limite a b. Linens et aux arthrobacter. Il est incapable de se repliquer dans corynebacterium glutamicum ou dans escherichia coli. Ni pbla8 ni ses derives ne semblent produire d'adn simple brin dans b. Linens ou dans arthrobacter aureus. Ceci suggerant que pbla8 ne se replique pas selon un mecanisme de cercle tournant. La sequence nucleotidique du replicon minimal contenu sur un fragment d'adn ecori-psti de 2,5 kb, ne montre aucune homologie avec des plasmides de type cercle tournant connus, ni au niveau nucleotidique ni avec les proteines codees par ces plasmides. Le comportement des intermediaires de replication en electrophorese bidimensionnelle, ainsi que l'homologie determinee entre la sequence deduite de l'orf1 de pbla8 et les proteines de replication des plasmides de type theta, suggerent que pbla8 se replique suivant un mecanisme theta. C'est le premier rapport concernant l'existence de plasmides de type theta chez les bacteries coryneformes. Le vecteur de clonage derive de pbla8 presente une bonne stabilite chez les souches b. Linens et arthrobacter. Des vecteurs utilisant les fonctions integratives de phages temperes isoles de bacteries coryneformes, aau2, 16, 304l et 304s, ont ete developpes. Ces vecteurs de clonage et de fusion de genes, s'integrent par recombinaison site specifique dans diverses souches d'interet industriel. Ce sont les premiers outils genetiques derives de corynephages decrits. Ces vecteurs presentent une efficacite de transformation par electroporation identique ou superieure a celle obtenue avec des plasmides replicatifs. Nous avons montre que les vecteurs peuvent etre conjointement presents dans le chromosome de chacune des souches hotes, offrant de larges possibilites de modification genetique de ces souches