Polarisation des cellules epitheliales renales transport de choline et synthese de phosphatidylcholine
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Une caracteristique de la structure des cellules epitheliales renales est la distribution polarisee des lipides entre le domaine apical et basolateral de la membrane plasmique. La presente etude a consiste a determiner les relations existant entre la polarisation des cellules mdck, la distribution du transport de choline et la synthese de phosphatidylcholine (pc). Une double approche basee sur l'utilisation d'une proteine specifique de transfert de la pc, et sur l'etude des etapes de la voie de biosynthese de ce phospholipide nous a permis de mettre en evidence: 1) la possibilite de changer une partie de la pc membranaire grace a une proteine specifique de transfert. L'utilisation d'une telle proteine a montre que le feuillet externe de la membrane apicale des cellules mdck contient au moins 5 a 8% de pc. 2) la presence d'un systeme de transport specifique de la choline dans les cellules mdck, caracterise par un km de 43 m et un vmax de 284 pmol/mg prot/5 min. Le transporteur est independant de la presence de sodium, il est inhibe par la carence en atp, l'addition de kcl ou la presence d'un inhibiteur specifique, l'hemicholinium-3. La distribution de ce systeme de transport est polarisee. Il est preferentiellement localise et/ou actif au pole basolateral des cellules cultivees sur support poreux. 3) une relation etroite entre le transport de choline et la voie de biosynthese de pc. La synthese de pc transite par la voie de la cdp, elle est polarisee et depend preferentiellement de l'entree basolaterale de choline pour les cellules cultivees sur filtre. Nos resultats suggerent fortement la presence d'un channeling polarise pour la synthese de pc dans les cellules mdck