Abstract FR:

La videomicroscopie a bas niveau de lumiere permet de visualiser la chromatine de l'embryon precoce de souris, coloree par la sonde fluorescente hoechst 33342 (specifique de l'adn et vitale), sans perturber son developpement. Cette approche a ete utilisee pour etudier apres la fecondation, les phases de decondensation et de recondensation de la chromatine du spermatozoide, en relation avec les differentes etapes de la formation du pronoyau femelle. Une etude ultrastructurale conjointe, realisee par microscopie electronique, nous a permis de montrer que la formation du pronoyau male survient 120 a 150 minutes apres l'expulsion du second globule polaire, et correspond au stade tres recondense de la chromatine paternelle. Cette methodologie a ete developpee pour la mesure quantitative de l'intensite de fluorescence du noyau. Nos resultats montrent qu'il est desormais possible par cette methode, de determiner le stade nucleaire (g1 ou g2) d'une cellule vivante isolee. Il apparait ainsi que la videomicroscopie a bas niveau de lumiere permet d'utiliser les changements morphologiques et quantitatifs de la chromatine des noyaux comme base d'une veritable horloge cellulaire. Combinee a d'autres techniques d'analyse, elle offre alors une certaine souplesse pour l'etude de problemes biologiques car elle permet une investigation guidee par l'image