Clonage, structure et etude de l'expression du gene de la methionyl-tarn synthetase d'escherichia coli
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Paris 6Disciplines:
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Le gene metg codant pour la methionyl-tarn synthetase d'e. Coli a ete clone et sequence. La region en amont de ce gene a revele une phase ouverte divergente codee par l'autre brin d'adn et demarrant seulement 132 nucleotides en amont. Cette phase ouverte, appelee mrp, code pour une proteine de 39 kd de fonction inconnue mais presentant un site consensus de fixation de l'atp retrouve dans plusieurs atpases. Les signaux de transcription de ces deux genes ont ete determines. Mrp et metg constituent des operons monocistroniques, mais ce dernier peut etre exprime a partir de deux promoteurs, l'un proximal situe dans la region intergenique et l'autre distal situe 500 bases en amont, dans le gene mrp. La transcription du promoteur distal est modulee par un terminateur situe avant metg. Des fusions genetiques metg: lacz ont ete construites et ont permis de montrer que l'expression de metg etait regulee par le niveau intracellulaire d'activite de la methionyl-tarn synthetase. Ces resultats sont en accord avec les travaux physiologiques anterieurs. Un modele moleculaire de l'expression de metg base sur ces resultats a pu etre propose. Il postule que la methionyl-tarn synthetase se fixe sur son arn amont, au niveau d'un site presentant des homologie avec son substrat le tarn. Cette fixation modulerait la terminaison au niveau du terminateur amont, dans un mecanisme analogue a l'attenuation. Les outils informatiques realises pour ce travail sont egalement presentes