thesis

Caracterisation du transport de l'uree par diffusion facilitee : etude biochimique pharmacologique, fonctionnelle et moleculaire

Defense date:

Jan. 1, 1994

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

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Abstract FR:

L'uree est la principale forme d'elimination des dechets azotes du metabolisme des proteines chez les mammiferes. Au niveau du rein, l'uree permet le maintien du gradient osmotique cortico-papillaire participant ainsi a la formation d'une urine hypertonique. Le transport de l'uree sensible a l'adh implique dans ces mecanismes a ete realise comparativement a celui de l'eau selon deux axes: le transport d'uree et de l'eau a travers la vessie de grenouille rana esculenta, modele classique du tubule collecteur de rein de mammifere, a ete etudie a l'aide d'une technique de mesure des flux unidirectionnels de #1#4c-l'uree et du #3h#2o du milieux exterieur vers le milieu interieur. Les variations observees en ce qui concerne les courbes dose-reponse de l'avt et de l'ampc et les reponses hydrosmotiques a l'ocytocine ainsi que la sensibilite a la pge#2 et au probenecide montrent clairement que le developpement des permeabilites a l'eau et a l'uree necessite des voies des passages distinctes et que les regulations empruntent des mecanismes differents. Les reponses a l'avt obtenues pour l'eau et pour l'uree permettent de penser que les recepteurs de l'hormone antidiuretique sont pour l'essentiel les recepteurs v2 mais que les recepteurs v1 et v2 interagissent au niveau des cellules epitheliales sur les mecanismes de production d'ampc lequel active des proteines kinases a probablement de differents types. L'etude moleculaire de ce transporteur de l'uree a ete realise par son expression fonctionnelle. La microinjection de l'arnm purifie a partir de cellules epitheliales de vessie de grenouille dans des ovocytes de xenopus laevis a permis une augmentation de la permeabilite a l'uree des ovocytes d'un facteur compris entre 3 et 7. Le fractionnement electrophoretique de l'arnm efficace a montre que le transporteur d'uree etait code par un arn de longueur comprise entre 6 et 10 kilobases