Abstract FR:

La microspectrofluorimetrie laser est une technique permettant l'analyse spectrale de l'emission de fluorescence d'un chromophore en provenance d'un microvolume de taille compatible avec une approche subcellulaire. Son applicabilite a une utilisation avec snarf-1 (marqueur fluorescent de ph) a ete demontree, et a permis d'obtenir des resultats varies: repartition gaussienne du ph intracellulaire sur une population homogene de lymphocytes murins a20; mesure de la repartition topologique du ph intracellulaire dans un systeme cellulaire dimorphique fongique candida albicans; mesure du ph intracellulaire de leishmania braziliensis, parasite se developpant dans les cellules du systeme reticulo-endothelial. Cette mesure a ete realisee sur le parasite a l'interieur-meme de son hote; mesure systematique d'une difference de ph entre noyau et cytoplasme d'une meme cellule issue de 5 populations cellulaires differentes. Enfin, l'utilisation conjointe de deux fluorophores: snarf-calceine (un derive de snarf-1) et fluo-3, a permis la mesure d'une difference de concentration calcique entre le noyau et le cytoplasme d'une meme cellule