Abstract FR:

Chez les bacteries, la coordination entre la synthese d'adn et la croissance cellulaire s'effectue principalement a travers le controle de la frequence d'initiation de la replication a l'origine. Il existe, chez b. Subtilis, un mecanisme supplementaire de regulation, capable de detecter un desequilibre entre la croissance cellulaire et la replication du chromosome et de bloquer, en retour, le replisome en aval de l'origine. Il depend du systeme stringent, un reseau de regulation permettant de coordonner la synthese de nombreuses voies metaboliques avec l'etat nutritionnel du milieu, a travers le niveau intracellulaire d'une alarmone, le ppgpp. Nous avons montre que les fourches de replication sont bloquees dans des regions specifiques de part et d'autre de oric, appelees lster et rster. Le blocage du replisome, dans ces regions, depend de la proteine rtp, une anti-helicase, impliquee dans l'arret de la replication dans la region du terminus. L'analyse precise du mecanisme de l'arret a ete entreprise, en clonant l'une des regions, lster2, dans un plasmide se repliquant selon un mode theta unidirectionnel. Nous avons montre que le blocage de la replication du plasmide depend de rtp et du niveau intracellulaire de ppgpp. L'arret est detecte uniquement lorsque le fragment est oriente de la meme facon, que sur le chromosome, par rapport a la direction de la replication. Le site lster2 a ete localise dans un fragment de 3,65 kb. Rtp exerce sa fonction au niveau du terminus en s'associant a des sequences d'adn, les sites ter. Nous avons montre que rtp se fixe, in vitro, a une sequence de 17 pb dans le fragment de 3,65 kb. Cette sequence constitue un element essentiel du site lster2. Cependant, d'autres elements semblent etre necessaires en cis pour l'arret du replisome. Le mecanisme d'action de l'anti-helicase rtp au niveau du site lster est discute.