thesis

Differenciation morphologique et fonctionnelle des segments distaux du nephron de lapin en culture primaire

Defense date:

Jan. 1, 1994

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Authors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le but de notre travail etait d'explorer l'origine des cellules intercalaires des tubules connecteurs et collecteurs corticaux (tcc). Nous avons etudie leur evolution dans une culture primaire de tcc. Nous avons cherche a savoir si des cellules du tubule distal contourne (tdcb) en culture primaire prenaient des caracteristiques de cellules intercalaires. Nous avons utilise des marqueurs specifiques des differents types cellulaires trouves dans le tcc et le tdcb: les anticorps monoclonaux acm 703, acm 503, et acm 501 diriges contre les membranes apicales des cellules principales, des cellules intercalaires du tcc et des cellules du tdcb respectivement, et deux marqueurs empiriques, une lectine d'arachide specifique des cellules intercalaires b et un anticorps anti-bande 3, specifique des cellules intercalaires a. Dans une culture primaire de tcc, les cellules perdent rapidement leurs caracteristiques morphologiques. Pourtant, les anticorps acm 503 et acm 703 continuent de se lier sur les membranes apicales de certaines cellules. Les cellules marquees a l'acm 503 gardent une activite d'une pompe a protons, preuve que les cellules en culture gardent certaines specificites fonctionnelles. Entre deux et quatre jours de culture, tres peu de cellules intercalaires sont observees en mitose tandis que leur nombre relatif augmente. Pendant ce meme temps, la majorite des cellules en mitose est marquee a l'acm 703 tandis que le nombre relatif des cellules liees a cet anticorps diminue. Ces resultats suggerent que les cellules intercalaires derivent des cellules principales. Cependant, l'interpretation des resultats est genee par la presence de cellules marquees a aucun des anticorps, considerees comme des cellules dedifferenciees. Le marquage a la lectine d'arachide a montre qu'assez rapidement cette lectine ne se limite plus aux cellules intercalaires. Les cellules du tdcb en culture primaire prennent un aspect different des cellules in situ et qui rappelle celui des cellules intercalaires. Les observations en immunofluorescence revelent que certaines cellules se lient a des marqueurs des cellules du tubule collecteur. Il n'a cependant pas ete possible de trouver des tests permettant de distinguer fonctionnellement differents types cellulaires