thesis

Localisation histologique des deux isoformes de l'enzyme de conversion de l'angiotensine i : contribution a l'etude du role specifique de l'isoforme testiculaire dans la fertilite male

Defense date:

Jan. 1, 1997

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

L'enzyme de conversion de l'angiotensine i (eca) appartient au systeme renine angiotensine (sra), systeme vasoconstricteur qui module la pression arterielle et l'equilibre hydro-electrolytique. Le clonage de l'adnc de l'eca a demontre l'existence de deux isoformes, l'une de repartition ubiquitaire, l'autre exclusivement localisee dans le testicule. Nous avons etudie la distribution tissulaire et cellulaire de ces deux isoformes a l'aide de deux techniques morphologiques employees sur des tissus fixes et inclus en paraffine : l'hybridation in situ (his) qui localise les arnm et l'immunohistochimie qui localise les proteines. Dans notre protocole d'his utilisant des ribosondes marquees au (#3#5s), un traitement des coupes tissulaires par la chaleur d'un four a micro-ondes est effectue avant l'etape d'hybridation. La detection de l'isoforme somatique et de ses arnm dans les cellules endothelales et epithelales a permis de montrer qu'il existe une synthese et un stockage de l'eca par les memes cellules. L'isoforme testiculaire a ete specifiquement etudiee au sein de l'epithelium seminifere d'especes murines. L'eca s'exprime apres la puberte, dans les cellules germinales haploides, depuis la spermatide ronde jusqu'au spermatozoide. La suite de ce travail a demontre qu'il n'existait pas de sra intra-testiculaire et finalement l'existence de l'eca testiculaire demeurait une curiosite inexplicable. La generation par une equipe americaine, de souris depourvues des deux isoformes, obtenues apres inactivation du gene de l'eca par recombinaison homologue, a relance le debat sur le role de l'eca testiculaire dans la fertilite male, car les males homozygotes se sont averes tres peu fertiles. Notre collaboration avec cette equipe pour comprendre le role l'eca dans la fertilite male a permis d'expliquer certaines particularites de la spermiogenese et d'emettre des hypotheses quant a son implication dans le processus de fecondation.