Abstract FR:

La strategie triple-helice presente des interets biologiques et therapeutiques importants puisqu'elle vise a controler artificiellement l'expression des genes. Une des restrictions de cette strategie reside dans le type de sequences d'adn pouvant etre reconnues. Celles-ci doivent etre obligatoirement de type oligopyrimidine-oligopurine sur une quinzaine de paires de bases. Afin d'elargir le spectre de sequences susceptibles de former des triple-helices, nous avons concu des oligonucleotides capables de se fixer sur des sequences qui sont maintenant de type oligopurine / oligopyrimidine alterne. Dans une premiere approche, des oligonucleotides de meme configuration (soit hoogsteen, soit hoogsteen-inverse) ont ete relies par leurs bases terminales a l'aide d'un bras de liaison chimique pour donner naissance a un oligonucleotide saut de brins. La seconde approche utilise des oligonucleotides en configurations differentes (hoogsteen et hoogsteen-inverse) qui peuvent etre simplement relies par une liaison phosphodiester classique. La stabilite de la triple-helice saut de brins peut etre augmentee en optimisant la traversee du grand sillon de l'oligonucleotide saut de brin. Cette etude permet de completer le code moleculaire du saut de brins qui apporte des indications precises et rationnelles quant a la composition de l'oligonucleotide saut de brin au niveau de chaque type de jonctions oligopurine / oligopyrimidine alternees. La seconde restriction de la strategie triple-helice reside dans la faible stabilite des complexes formes. Une voie de recherche s'est donc developpee pour tenter de mettre en evidence des molecules capables de stabiliser specifiquement les triple-helices. A partir de composes de reference, les benzopyridoindoles (bpi), d'autres familles de molecules ont ete developpees pour leurs proprietes de stabilisation importantes. Cette etude permet de definir les criteres d'un intercalant specifique de triple-helice. Celui-ci devrait etre une molecule pentacyclique courbee a la maniere d'un croissant et portant une chaine laterale alkylamine positivement chargee pointant dans un des sillon de l'adn triple-brin. Ces ligands ont ete fonctionnalises par liaison a un agent de coupure, ce qui a permis d'obtenir des informations importantes quant a la localisation de leur chaine et de mette en evidence pour la premiere fois l'existence d'une sonde chimique positive pour la formation de triple-helices. Cette approche offre de plus, de nouvelles perspectives dans la conception rationnelle de nouveaux ligands de l'adn.