Evolution des permeabilites ioniques au cours de la differenciation in vitro des cellules des grains du cervelet de rat : definition du potential de repos et caracterisation de la permeabilite du recepteur gaba#a
Institution:
Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)Disciplines:
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Le developpement in vitro des cellules des grains du cervelet est favorise par le glutamate, dont l'effet est mime par un milieu enrichi en kc1. La depolarisation attendue est sensee induire une augmentation du calcium intracellulaire, qui semble indispensable a la survie des grains en culture. Les travaux publies ont cependant rapporte un potentiel tres bas et jete quelques doutes quant a l'existence de permeabilites calciques dependantes du potentiel en debut de culture. Le potentiel de repos des grains du cervelet de rat a ete etudie durant la premiere semaine en culture primaire. Le potentiel, mesure a l'aide de la sonde fluorescente bis-oxonol, est de -40 mv des le premier jour, et atteint -60 mv au jour 8. L'augmentation du kc1 externe de 5 a 30 mm entraine une depolarisation qui croit avec l'age des cellules. Cette depolarisation provoque, par la voie de canaux calciques dependants du potentiel (essentiellement n et l), une augmentation du calcium intracellulaire, mesuree avec le fura-2. Ces observations demontrent la presence de canaux calciques fonctionnels des le premier jour de culture, et indiquent un accroissement progressif de la part des permeabilites potassiques dans la definition du potentiel de repos. Le gaba constitue, pour les cellules des grains, un autre facteur trophique dont le mode d'action passe par le recepteur-canal gaba#a, permeable non seulement a c1#-, mais aussi a hco#3#-. La permeabilite aux ions hco#3#- pourrait donc influencer, dans un sens depolarisant, la variation de potentiel induite par le gaba. La permeabilite relative p#h#c#o#3/p#c#1 a ete determinee en patch-clamp a partir du potentiel d'inversion de la reponse gaba#a. Avec hco#3#- du cote intracellulaire, une valeur de p#h#c#o#3/p#c#1 de 0,18 a ete obtenue, comparable aux valeurs de la litterature. Par contre, avec hco#3#- du cote extracellulaire, p#h#c#o#3/p#c#1 chute a 0,07. Une telle rectification entrante du courant bicarbonate induit par le gaba n'a pas encore ete decrite