Contribution a l'etude des canaux anioniques de l'hypocotyle chez arabidopsis thaliana : approche pharmacologique et caracterisation electrophysiologique
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Deux approches differentes ont ete utilisees pour explorer les fonctions des canaux anioniques dans la physiologie de jeunes plantes d'arabidopsis. La premiere est une etude des effets des inhibiteurs de canaux anioniques sur le developpement. La seconde est une caracterisation electrophysiologique d'un canal anionique dans les cellules epidermiques d'hypocotyle d'arabidopsis par la technique du patch-clamp. Nous avons etudie les effets des inhibiteurs de canaux anioniques sur le developpement de l'hypocotyle. Notamment, nous avons pu montrer que certains inhibiteurs de canaux anioniques comme le dids, le sits et le 9-ac sont capables de stimuler legerement l'elongation des hypocotyles mais surtout, qu'ils interferent avec les reponses aux auxines des hypocotyles: alors que les auxines induisent une forte inhibition de l'elongation et une desintegration des assises cellulaires peripheriques de l'hypocotyle, le 9-ac, le dids et le sits sont capables de restaurer une elongation et une structure normale lorsqu'ils sont co-appliques avec les auxines. Ces resultats suggerent que des canaux anioniques sont impliques dans les reponses de l'hypocotyle aux auxines. Nous avons caracterise un canal voltage-dependant de la membrane plasmique des cellules epidermiques de l'hypocotyle d'arabidopsis. Ce canal presente une cinetique d'activation rapide, une forte voltage dependance et une selectivite en faveur du nitrate semblables a celles de deux autres canaux anioniques deja decrits chez les cellules de garde de vicia faba et chez les cellules de tabac cultivees en suspension. Cependant, ce canal possede des proprietes originales: sa pharmacologie, qui se caracterise globalement par une faible sensibilite aux inhibiteurs de canaux chlorure comme le 9-ac, le dids, le nppb et l'iaa-94, le differencie des autres canaux anioniques connus chez les plantes. Par ailleurs, la modulation par les nucleotides de sa regulation par le potentiel membranaire est egalement une propriete originale. Cette regulation ne fait pas intervenir l'hydrolyse des nucleotides mais parait plutot mettre en jeu un site de fixation specifique de ce type de molecules, soit sur le canal lui-meme, soit sur une proteine qui le regule. La possibilite que cette regulation puisse coupler efficacement l'atpase pompe a protons de la membrane plasmique et le canal anionique est discutee