Abstract FR:

L'aminoacide selenocysteine represente la forme biologique du selenium incorpore cotraductionnellement dans les selenoenzymes. Chez les procaryotes, l'incorporation de selenocysteine fait appel au trna selenocysteine, au codon uga situe dans un contexte particulier et a un facteur d'elongation specifique nomme selb. Le systeme eucaryote est moins bien connu et le but de ma these etait d'aider a une meilleure comprehension des mecanismes presidant au decodage de la selenocysteine chez les eucaryotes. Mes travaux de these ont porte essentiellement sur l'etude du trna selenocysteine eucaryote. J'ai, dans un premier temps, determine la structure secondaire et tertiaire de ce trna. Ceci a ete realise sur des trna transcrits in vitro, en utilisant une large panoplie de sondes de structure, enzymatiques et chimiques. La deuxieme partie de mon travail de these a consiste a etablir la liste des nucleotides modifies du trna#s#e#c en utilisant le systeme de microinjection de genes du trna#s#e#c ou de transcrits radioactifs dans les oocytes de xenopus laevis. J'ai montre notamment que u34, premiere base de l'anticodon du trna#s#e#c, est modifie en mcm#5u34, dans le cytoplasme des oocytes et ce, de maniere assez complexe. La derniere partie de mon travail de these porte davantage sur l'aspect fonctionnel de la molecule. Nous avons montre que les deux paires de bases non canoniques de l'helice acceptrice ainsi que la longueur exceptionnelle de l'helice d semblent avoir ete conservees au cours de l'evolution, pour la reconnaissance du trna par les facteurs agissant dans les etapes posterieures a la charge. Enfin, en collaboration avec l'equipe du dr. Bock, nous avons demontre que le trna#s#e#c eucaryote fonctionne de facon parfaitement correcte dans le systeme d'incorporation de selenocysteine chez les procaryotes