Abstract FR:

Une methode de dosage fluorogenique tres sensible, utilsant des peptidyl-3-amino-9-ethylcarbazole (aec), a permis de purifier une cysteine proteinase neutre de 68 kda specifique des sequences peptidiques glca-val-leu-gly-lys (ou arg)-aec. Son origine parasitaire a ete demontree par 1) l'etude comparative avec les proteinases de la cellule-hote, 2) l'identification de la proteinase dans les merozoites libres, 3) la purification de l'enzyme apres marquage metabolique. Des inhibiteurs peptidiques reversibles et irreversibles derives des sequences val-leu-gly-lys (ou arg) ont montre le role essentiel de cette proteinase dans le processus de reinvasion des hematies par les merozoites. La recherche des cibles biologiques a necessite la mise au point d'un milieu semi-defini a base des lipiproteines hdl (d=1,063-1,210) capable d'assurer la culture in vitro de p. Falciparum sur plusieurs cycles. Ce milieu a permis: 1) l'identification d'une cysteineproteinase de 110 kda, immunodominante et liberee lors de la phase de reinvasion et 2) la demonstration du role essentiel des lipoproteines hdl sur la differenciation du parasite. Apres invasion, la transformation du merozoite en jeune trophozoite jusqu'a la 24eme heure du cycle erythrocytaire est independante des elements seriques. Apres cette periode, les lipoproteines hdl, ldl ou vldl peuvent induire la premiere division nucleaire du schizonte, mais, seule la fraction lipidique hdl permet l'evolution normale de la schizogonie. Les echanges lipidiques d'effectuent par un flux unidirectionnel, sans endocytose des apolipoproteines des hdl et sont dependants du stade parasitaire