thesis

Construction de transgenes specifiant la caseine kappa caprine. Etude de leur expression dans des souris transgeniques et effet de la caseine kappa recombinante sur la stabilite et la taille des micelles. Application a l'espece caprine

Defense date:

Jan. 1, 1997

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Institution:

Paris 11

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le lait des ruminants contient six lactoproteines majeures : quatre caseines (alpha-s1, alpha-s2, beta et kappa), presentes essentiellement sous forme d'agregats stables appeles micelles, et deux proteines du lactoserum (alpha-lactalbumine et beta-lactoglobuline). La caseine kappa, joue un role primordial dans la formation et la stabilite des micelles et l'obtention d'un lait riche en caseine kappa devrait permettre d'etudier ses proprietes nutritionnelles et technologiques a priori interessantes. Dans ce but, l'utilisation de la transgenese est un outil adapte et l'obtention de chevres transgeniques devrait aussi permettre d'etudier l'influence de ces parametres sur la structure et les proprietes de micelles natives. Mais pour des raisons techniques et financieres, la faisabilite de tout projet en transgenese est d'abord testee sur un animal modele : la souris. Nous avons obtenu des souris transgeniques pour deux constructions specifiant la caseine kappa caprine : la premiere, correspondant au gene natif depourvu de 500pb d'une sequence line intronique, n'a pas permis de produire la proteine recombinante a des concentrations superieures a 20g/ml et a ete abandonnee. La seconde, correspondant a un gene hybride dans lequel les sequences specifiant la caseine kappa etaient controlees par le promoteur du gene caseine beta caprin, a permis de produire la proteine recombinante a des concentrations superieures a 3mg/ml et par allele. Nous avons teste la fonctionnalite de cette proteine in vivo et in vitro : celle-ci possede des proprietes identiques a son homologue caprin in vitro mais sa presence en grande quantite dans le lait des souris transgeniques n'a pas ete correlee a une diminution significative de la taille des micelles. Une etude des micelles murines in vitro semble indiquer que la caseine kappa murine possede des proprietes differentes de son homologue caprine ; proprietes qui pourraient etre dues en partie a son contenu moindre en cysteines.