Utilisation des genes de la voie d'assimilation du nitrate chez aspergillus nidulans pour la mise au point de la transformation chez fusarium oxysporum et l'etude de la regulation chez aspergillus nidulans
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
Cette these est en deux parties. La premiere decrit l'utilisation du gene codant pour la nitrate reductase (niad) chez aspergillus nidulans pour developper un systeme de transformation chez fusarium oxysporum. Ceci ouvre une nouvelle voie pour l'etude moleculaire et genetique de ce champignon phytopathogene; en effet, l'expression du gene d'aspergillus chez fusarium (et ceci, en depit d'une faible homologie nucleotidique), indique qu'il n'existe une conservation des proteines au niveau fonctionnel et certainement au niveau des mecanismes de regulation. La seconde partie de la these concerne la regulation des genes niia (codant pour la nitrite reductase) et niad d'aspergillus. Ces deux genes, qui sont tres lies et localises sur le chromosome viii, ont ete clones; nous avons demontre que l'induction et la repression de ces genes se font au niveau transcriptionnel. Dans le cas du gene niia, l'absence d'un produit regulateur nira conduit a une non-induction de ce gene. De plus, ce gene possede deux transcrits; le plus petit est tres exprime en presence d'inducteur alors que le plus grand est present uniquement, et en faible proportion, dans des conditions de repression et de non-induction. L'etude de la mutation nis5 (translocation non reciproque) au niveau moleculaire confirme les resultats enzymologiques et physiologiques. L'expression du gene niia est augmentee en conditions reprimees et non induite alors que celle du gene niad n'est pas affectee. Dans une souche portant cette mutation, seul, le petit transcrit est exprime et ceci meme dans une souche portant les deux mutations nira87 et nis5. Les points de cassure de la translocation ont ete clones et sequences et ainsi le point d'insertion dans la region intergenique niia-niad a ete precise