Abstract FR:

L'objectif de ce travail est d'identifier les determinants de specificite tissulaire mis en jeu dans l'expression des genes d'apolipoproteines, en associant les approches in vitro, ex-vivo et transgenique, a l'aide de deux modeles : 1. L'apo a-ii, exprimee exclusivement dans le foie et, 2. Le cluster d'apos ai/ciii/aiv, au sein duquel l'apo c-iii est exprimee davantage dans le foie que dans l'intestin, l'apo a-iv principalement dans l'intestin et l'apo a-i dans les deux tissus. Nous avons montre que les 911 pb du promoteur de l'apo a-ii contiennent les elements necessaires et suffisants pour diriger son expression hepatique. L'expression du gene de l'apo a-ii est associee a un environnement chromatinien ouvert specifiquement dans le foie. Nous avons ainsi expliquer l'expression illegitime de l'apo a-ii dans la lignee cellulaire intestinale caco-2, puisque dans cette lignee le gene de l'apo a-ii presente une configuration chromatinienne de type hepatique. L'expression intestinale des genes du cluster ai/ciii/aiv est controlee par une seule et meme region, l'enhancer de l'apo c-iii. La cartographie in vitro de cette region est differente dans le foie et dans l'intestin. L'enhancer de l'apo c-iii ne permet pas d'etablir un gradient d'expression crypto-villositaire. Notre travail a permis de montrer que la region distale du promoteur de l'apo a-iv restreint l'expression aux enterocytes des villosites. L'etude de l'expression intestinale des genes impliques dans le metabolisme lipidique a ete jusqu'a present peu developpee faute d'un modele cellulaire. Nous avons donc developpe un modele de culture cellulaire visant a accentuer la differenciation des cellules caco-2 et a leur faire acquerir un profil d'expression des genes du metabolisme lipidique voisin de celui observe dans la cellule enterocytaire. Nous montrons que l'expression des arnm des apos a-i, c-iii et a-iv est augmentee ou induite lorsque les cellules caco-2 sont cultivees sur un filtre semi-permeable. L'expression de la fabp-i et de l'apobec sont egalement induites dans cette condition de culture la culture des cellules caco-2 sur un filtre recouvert d'une lame basale avec une distribution asymetrique de milieu module l'expression des genes du cluster d'apos ai/ciii/aiv.