Abstract FR:

La ferritine, principale proteine de stockage du fer, est constituee d'une coquille proteique de 24 sous-unites et d'un noyau ferrique. Les sous-unites peuvent etre de deux types h ou l, codees par des genes distincts. Des etudes in vitro des sous-unites recombinantes ont montre que les sous-unites h et l cooperent pour assurer l'incorporation du fer dans la molecule de ferritine. Les genes h et l ferritine sont regules au niveau transcriptionnel de facon tissu-specifique et au niveau traductionnel via une proteine dont l'activite depend du fer libre intracellulaire. Afin de preciser le role de la sous-unite h-ferritine in vivo, des transfections stables de cellules erythroleucemiques murines ont ete realisees avec une construction permettant de surexprimer la h-ferritine. L'utilisation d'un traceur fluorescent (la calceine), sensible aux ions metalliques, nous a permis de montrer que la production d'une ferritine riche en sous-unite h entraine une chelation rapide du pool de fer libre. Cela se traduit par une diminution de la synthese de ferritine endogene et un defaut d'activation du gene -globine et de la synthese d'heme lors de l'induction de la differenciation. Par ailleurs, nous avons etudie les elements necessaires a la regulation transcriptionnelle tissu-specifique du gene h ferritine. Plusieurs lignees de souris transgeniques ont ete obtenues pour trois constructions contenant differents elements regulateurs. Le nombre de copies et le niveau d'expression du transgene dans les differents organes ont ete quantifies par pcr. Des constructions contenant jusqu'a 5kb de sequence 5' flanquante ont une expression comparable a celle du gene endogene dans de nombreux tissus, a l'exception du duodenum et des macrophages, ou l'expression du transgene reste tres inferieure a celle de l'endogene. Nous avons pu cependant verifier la fonction d'elements activateurs caracterises anterieurement dans des lignees cellulaires, notamment en reponse a l'heme.