Extraction, purification et evaluation biologique de substances naturelles d'interet cosmetique : applications a l'orobanche rapum et a skeletonema costatum
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L'objectif de ce travail etait d'acquerir une vue d'ensemble sur les techniques d'extraction, de purification et d'evaluation biologique. Les finalites etaient : rechercher de nouvelles molecules d'interet cosmetique a partir d'un domaine aussi varie que le milieu vegetal terrestre et marin, les isoler pour disposer de standards et fabriquer des extraits enrichis destines a la transposition industrielle. Pour illustrer cette problematique, deux plantes ont ete etudiees. La premiere est une plante terrestre, l'orobanche rapum, qui est riche en molecules polyphenoliques, l'oraposide et le verbascoside. Ces molecules, responsables d'une activite anti-radicalaire, ont ete purifiees par chromatographie de partage centrifuge pour obtenir leur standard a cout raisonnable. La deuxieme plante etudiee est une microalgue marine, skeletonema costatum, pour laquelle il a fallu rechercher les molecules d'un extrait lipidique produisant une inhibition de la phophodiesterase. Ces molecules se sont revelees etre des acides gras. Nous en avons d'abord elabore un extrait selectif, a partir duquel nous avons purifie les trois acides gras inhabituels par chromatographie liquide preparative a l'aide d'un support innovant, le carbone graphitise poreux. Ces trois acides gras ont ainsi pu etre identifies par spectrometrie de masse (grace aux derives dimethyloxazoline), infrarouge et resonance magnetique nucleaire. Enfin, cette etude a permis de mettre en evidence les limites de la technique qui nous permettait de mesurer l'inhibition enzymatique. C'est la raison pour laquelle, nous avons evalue les performances d'une autre methode impliquant l'electrophorese capillaire.