thesis

Contribution à l'étude analytique et génotoxique des mycotoxines

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Jan. 1, 1986

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Ce travail concerne l'élaboration d'une méthode de détection de souches toxinogènes et l'étude d'une activité génotoxique de diverses mycotoxines sur le SOS chromotest. Une technique de recherche de souches toxinogènes a été appliquée à 114 Micromycètes après culture en milieu liquide. La mise en évidence des mycotoxines (aflatoxines B1, B2, G1 , G2, stérigmatocystine, ochratoxine A, patuline, acide pénicillique, citrinine et zéaralénone) est réalisée par chromatographie sur couche mince, après 2 à 4 jours de culture. La comparaison de 2 procédés - dépôt direct du milieu de culture et dépôt après extraction sans purification - montre que l'extraction des mycotoxines n'est pas nécessaire. Une étude en cinétique de la production des aflatoxines B1, B2, G1, G2 et l' ochratoxine A prouve que ces métabolites sont élaborés dès les premiers jours de culture. La technique décrite est simple, rapide et sensible. La génotoxicité de 17 mycotoxines (aflatoxines B1, B2, G1, G2 , aflatoxicol, stérigmatocystine, acide norsolorinique, avérufine, versicolorine A, ochratoxine A, citrinine, patuline, acide pénicillique, zéaralénone, zéaralénol, toxine T -2 et diacétoxyscirpénol) a été évaluée sur un test d'altération primaire de l'ADN, le SOS chromotest (souche Escherichia coli PQ 37) avec et sans activation métabolique. L'activité génotoxique avec activation métabolique est confirmée pour les toxines du groupe de l'aflatoxine B1 ayant la double liaison en 8-9. Ce groupe présente de plus une action génotoxique sans activation métabolique. Les autres mycotoxines ne présentent aucun effet génotoxique. L'explication de l'effet positif observé sans activation métabolique pour le groupe de l'aflatoxine B1 a été recherchée. Une étude analytique a été réalisée en particulier par la méthode du "post labeling" - sur l'ADN de la souche PQ 37 cultivée en présence d'aflatoxine B1. Le but était de vérifier certaines hypothèses émises concernant l'interaction aflatoxine B1 - ADN : - stimulation de la protéine RecA sans altération primaire de l'ADN, - activation métabolique de l'aflatoxine B1 par la souche bactérienne, - déclenchement du système SOS consécutif à des interactions de l’aflatoxine B1 au niveau de l'ADN sans formation d'époxyde.